单层细胞培养由于细胞在体外改变的环境下增生逐渐丧失了原有的性状,往往和体内情况不相符;动物实验虽在体内进行,但体内多种因素制约以及体内和外界环境相互影响而不能观察到研究者较为关心的中间过程。三维细胞培养技术模拟体内的微环境,填补了单层细胞培养和动物实验的鸿沟。该技术在医学领域的广泛运用,用人工脉管取代细胞外基质生长支架,在完全可控制的生长条件下,肾干细胞能分化产生结构完整的肾小管,在肾的发育生物学研究和组织工程领域作出了*特贡献。
细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法。
细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL。
细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
其他实验
细胞恶性程度:软琼脂实验
细胞屏障:跨膜电阻、荧光黄透过率
细胞粘附实验
共培养实验
裸鼠成瘤实验
细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,三维细胞培养支架,而洗刷消毒在另一室。还有细胞培养的温度,和合适的气体环境。细胞操作主要是无菌,三维细胞培养技术,一旦被感染什么都做不了。
⑴**净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类;
⑵无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,临沂三维细胞培养,倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等;
⑶操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,三维细胞培养,普通天平及日常分析处理物 ;
⑷洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等.;
⑸分析间:显微镜,计算机及打印机等。
硬件是实验成功的基础,细胞培养的设备及环境,十分重要!